離心管的選擇與常用的三種離心方法

一、如何選擇離心管

玻璃離心管：不能在高、超速離心機上使用，只適用于低速離心機。

PA管和PP管：化學性能穩定，半透明，能耐高溫消毒。

PC管：透明度好，硬度大，能耐高溫消毒。但不耐強酸強堿及某些有機溶劑。主要用于5萬(轉/分)以上離心。

CN管：質地較軟，透明，但不耐強酸強堿及某些有機溶劑，不能高壓消毒。適合于蔗糖、甘油等密度梯度離心。透明，利于收集。

鋼制離心管：強度大，不變形，能抗熱，抗凍，抗化學腐蝕，應用廣泛，但使用時避免接觸強腐蝕性的化學藥品。

注意：

（1）塑料管使用有機溶劑必須符合與對應材料的相容性規定，聚丙烯(PP)離心管(瓶)不能與汽油、煤油等接觸使用。聚碳酸酯(PC)離心管(瓶)不能與汽油、乙醛、丙酮、乙醇、異丁醇、甲酚等接觸使用。聚乙烯(PE)離心管(瓶)不能與硫酸(50%、75%)、苯、汽油、煤油等接觸使用。

（2）離心管在高溫高壓下消毒，離心管要和管帽分開，如果擰合后一起消毒，容易引起離心管的變形而在實驗過程中發生危險。

二、離心管安裝注意事項

1.使用各種離心機時，必須事先在天平上精密地平衡所有的離心管、離心管蓋、掛籃和適配件等。平衡時重量偏差不得超過離心機說明書上所規定的范圍。

（1）重量配平，一般精密平衡要求偏差不超過0.1g，常規應用則要求一般不超過1g，重量偏差不得超過離心機說明書上所規定的范圍。

（2）密度配平，離心管內填充的材料必須密度相近，否則載荷會不均勻地分布。

（3）轉子中盡量避免裝載奇數個離心管，當轉子只是部分裝載時應均勻分布，以便使載荷均勻地分布在轉子體上。

（4）當為奇數個離心管時，加載平衡的平衡管內必須采用密度相近的材料填充，例如，從培養基中離心細菌，可以用水平衡。但不可以用水來平衡氯化銫。

2.裝載溶液時，要根據離心溶液的性質及體積選用適合的離心管依據離心機的具體操作說明進行。

3.當使用無蓋離心管時，液體不能裝得過多，以免離心時甩出，造成轉子不平衡、生銹或被腐蝕。

4.當使用蓋密封離心管要求抽真空時，一般要求必須將液體裝滿，以防止離心時塑料離心管的上部因真空變形。

常用的三種離心方法：差速離心法；速率區帶離心法；等密度區帶離心法。

一、差速離心法

                    差速離心法

差速離心法常用于生化樣品的粗制品提取利用不同的懸浮粒子在離心力場中沉降系數的差別，在同一離心條件下，不同粒子沉降速度不同，通過不斷增加相對離心力，使一個非均勻混合液體分散系統中各種大小、形狀不同的粒子分層沉淀。

操作過程中一般是在第一級離心后將上清液與沉淀分開，然后將上清液再在更高轉速條件下離心，分離出第二部分沉淀，如此往復逐級加高轉速，逐級分離出所需要的物質。差速離心的分辨率不高，沉淀系數在同一個數量級內的各種粒子不容易分開，常用于生化樣品的粗制品提取。

二、速率區帶離心

                    速率區帶離心

速率區帶離心是一種不完全的沉降分離，沉降效果受物質本身物理尺度的影響較大，一般應用在物質大小相異而密度相同的情況， 是指根據待分離的粒子在離心力作用下，在梯度液中沉降速度的不同，離心后具有不同沉降速度的粒子處于不同的密度梯度層內，形成幾條分開的樣品區帶，達到彼此分離的目的。

比如要從靜脈血中分離出單個核細胞，前一種分離液Ficoll將血液中的所有單個核細胞（淋巴細胞和單核細胞）分為一個層，同時提取。而Percoll分離液將血液中淋巴細胞和單核細胞分為兩個梯度層，分別提取。梯度液在離心過程中以及離心完畢后取樣時，起著支持介質和穩定劑的作用，避免因機械振動而引起已分層的粒子重懸。

采用速率區帶離心法時，需要嚴格控制離心時間，既要有足夠的時間使各種粒子在介質梯度液中形成區帶，又要避免任一待分離粒子形成沉淀狀態。

三、等密度區帶離心法

               等密度區帶離心法

等密度區帶離心是指液體分散體系中不同顆粒存在浮力密度差時，在離心力場下，顆?；蛳蛳鲁两?，或向上浮起，一直沿梯度移動到它們密度恰好相等的位置上，即等密度點，形成區帶的離心方法。

等密度區帶離心的離心效果取決于顆粒的浮力密度差，密度差越大，分離效果越好，與顆粒的大小和形狀無關，但后兩者決定著達到平衡的速率、時間和區帶的寬度。

等密度區帶離心方法的特點：

（1）與樣品粒子的密度有關；

（2）與樣品粒子的大小和其他參數無關 ；

（3）轉速、溫度不變，則延長離心時間也不能改變這些粒子的成帶位置。